目前，国内外对化妆品美白功效没有统一的评价标准，通常可根据产品的美白机制和作用途径，选择不同的评价方法，从图像、相关指标数据、志愿者或专家主观评估等方面，对产品的美白功效进行评价。

体外测试方法

酪氨酸酶活性抑制实验 人体肤色的差异主要取决于黑色素的含量及分布。酪氨酸酶是黑色素合成的主要限速酶，其活性决定黑色素形成的数量。化妆品对酪氨酸酶活性抑制作用的强弱，可作为评价产品美白功效的参考指标。

该实验利用从蘑菇中提取的酪氨酸酶，以L-酪氨酸或L-多巴为底物，加入受试物、酪氨酸酶等进行反应，然后测量其吸光值，计算得到酪氨酸酶抑制率，评估受试物对酪氨酸酶活性的抑制作用，评价其美白功效。

抗氧化实验 紫外线、体内代谢等因素会促使机体产生自由基。自由基可直接或间接调控酪氨酸酶的表达，加速皮肤黑色素的产生。抑制自由基的产生从一定程度上可抑制黑色素的产生，因此，可通过测试样品对自由基的抑制率，评价其美白功效。

黑色素细胞中的黑色素含量测定实验

黑色素细胞是机体形成、分泌黑色素的细胞，通过细胞生物学法测定黑色素细胞中的黑色素含量，是检测化妆品美白功效的有效方法。

该实验多通过在体外培养特定的黑色素瘤细胞模型，采用分光光度法、图像分析技术等，测试细胞内酪氨酸酶活性及黑色素含量，对受试物的美白功效进行评价。为更好模拟人皮肤中黑色素细胞的生长、黑色素的分泌，现在还常常采用黑色素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型。

角质形成细胞黑色素摄取实验 黑色素生成后，需要转移才能到达表皮层，因此，可以通过测试受试物抑制黑色素小体转移的情况，评价其美白功效。

该实验先在正常人表皮角质形成细胞培养基中加入受试物，然后加入带有荧光剂的黑色素颗粒，孵化4小时后，测量培养基中剩余荧光剂的剂量，考察受试物对黑色素小体转移的抑制效果。

非酶糖基化抑制实验 皮肤变黄和出现色斑的主要原因是脂质过氧化和非酶糖基化反应。其中，生物体内的非酶糖基化反应可生成高级糖基化终产物（AGEs）。AGEs为棕色或黑色的大分子物质，导致皮肤发黄、产生褐斑。

该实验通过在体外模拟体内蛋白质非酶糖基化的过程，测试受试物抑制AGEs生成的能力，评价其美白功效。

重组皮肤模型替代法 三维重组皮肤模型是利用组织工程技术，将人的皮肤细胞（含黑色素细胞）在培养皿中培养，构建具有三维结构的人工皮肤组织模型。

该方法在三维重组皮肤模型上涂抹受试物后，测定模型组织的酪氨酸酶活性、黑色素含量及相关酶的表达，表征受试物对黑色素的抑制作用。

人体评价方法

皮肤颜色测试 该方法利用仪器采集受试者使用化妆品前后的皮肤状态参数，并以数据或图片的形式呈现，可最大程度消除人为因素影响。目前，常用来评价皮肤颜色的探头式仪器有Skin-col or imeter CL400和Chromameter CR-400。这两种探头式仪器均应用反射分光光度法，通过检测皮肤表层结构上的紫外可见反射光，采用三维颜色空间分量的定量，模拟并还原描述人肉眼看到的物体颜色，经过计算，综合评价皮肤色度。

皮肤红黑色素测试 人类皮肤的颜色主要取决于人体皮肤中黑色素和血红素的含量。Mexameter Mx18是常用的测定皮肤色度的仪器，其结果输出以黑色素指数和红斑指数表示，黑色素指数越高，说明皮肤中所含的黑色素越多。

皮肤黑色素含量测试 该测试是一种客观的分析方法，使用光密度测量法，量化角质层中黑色素的含量。测试时，使用透明胶带将受试者的皮肤角质层剥离，用Fot ana-Masson银给剥离的样品染色，然后将样品置于配有内部光密度计的显微镜下，测定样品的光透射率，并以220放大倍率拍摄。使用0~10级的灰度判别来评估颜色的密度，再通过计算，测定角质层细胞中的黑色素含量。

皮肤光泽度测试 光泽度是构成物质表面视觉特征的重要参数之一。皮肤光泽度直接关系到光线进入人眼时的视觉效果，所以测试使用化妆品前后的皮肤光泽度，在一定程度上可以评价产品的美白效果。目前，评价皮肤光泽度的仪器主要有Skin-Gl ossymet er GL200和GonioLux4D。

VISIA拍照 用VI SIA拍照，通过分析图像可以评价化妆品的美白功效。常用的仪器设备有Visia和Vi sia-CR。对美白功效的评价，可选用标准光、UV光和交叉偏振光采集面部图像，并使用图像分析软件进行量化分析，以评估使用受试物前后皮肤颜色的变化。

主观评价法 主观评价法包括专家评估和志愿者自我评估两种方法。专家评估由经验丰富的专家，对志愿者使用受试物前后皮肤颜色的变化进行评分，评价受试物的美白效果。志愿者自我评估多采用调查问卷形式，由志愿者对使用受试物后肤色的改善情况进行评估。在实际操作中，主观评价法多与其他方法结合使用，以便更客观准确地评价化妆品的美白功效。

（何一凡 孙丽丽 作者单位：北京工商大学化妆品监管科学研究院）